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蛋白檢測



 一、蛋白質(zhì)印跡(WB)技術(shù)服務(wù):

蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗(yàn))即Western Blot。它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法,是將聚丙烯酰胺凝膠電泳分離后的蛋白質(zhì)從凝膠中轉(zhuǎn)移至固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。

技術(shù)服務(wù)優(yōu)勢:

1、在保證圖片結(jié)果美觀的同時(shí),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確,同批次樣品,至少做兩次實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證。
2、操作人員,有10年以上WB實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn),實(shí)事求是,確保結(jié)果準(zhǔn)確。
3、公司硬件設(shè)施齊全,電泳凝膠成像設(shè)備全部為進(jìn)口品牌,全部實(shí)驗(yàn)公司內(nèi)部完成,嚴(yán)格遵守商業(yè)保密規(guī)定,按時(shí)保質(zhì)完成客戶的各項(xiàng)委托。

實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:

客戶前期準(zhǔn)備

服務(wù)項(xiàng)目明細(xì)

樣品種類

樣品量

需要準(zhǔn)備的物品

蛋白提取、蛋白定量、免疫印跡。

細(xì)胞樣品

≥5×106個(gè)

●請(qǐng)?zhí)峁┐龣z測的樣品,以及檢測蛋白所需的一抗

動(dòng)物組織樣品

≥50mg

交付內(nèi)容及說明

交付內(nèi)容

服務(wù)說明

電子版數(shù)據(jù) (包括檢測報(bào)告、western 結(jié)果圖、灰度分析圖等)

1. 收到樣品后,會(huì)進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn),如檢測結(jié)果與我們要求不符,將停止試驗(yàn)并收取預(yù)實(shí)驗(yàn)相關(guān)費(fèi)用。
2.實(shí)驗(yàn)費(fèi)用及周期是針對(duì)正常實(shí)驗(yàn)樣品制定的,樣品特殊或樣品多時(shí)除外
3.一組樣品總數(shù)為8個(gè)以下(含陰性對(duì)照)。

報(bào)價(jià)及周期

服務(wù)項(xiàng)目

報(bào)價(jià)

服務(wù)周期(不含快遞時(shí)間)

蛋白提取

25元/樣

20個(gè)工作日

Western blotting(含內(nèi)參二抗,不含一抗)普通蛋白

450元

Western blotting(含內(nèi)參二抗,不含一抗)磷酸化蛋白

650元


二、ELISA技術(shù)服務(wù)

ELISA,即酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),是利用抗原或抗體在聚苯乙烯微孔板上固相化和抗原或抗體酶標(biāo)記的技術(shù),利用抗原抗體的特異性結(jié)合原理,來驗(yàn)證目標(biāo)抗原或抗體量的多少。我公司ELISA團(tuán)隊(duì)已參與開發(fā)多種商品化ELISA檢測試劑盒,對(duì)間接法、夾心法、競爭法ELISA都可熟練應(yīng)用。我公司配備有進(jìn)口多功能酶標(biāo)儀和高性能化學(xué)發(fā)光檢測儀器,保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確。


客戶前期準(zhǔn)備

客戶需提供檢測用試劑盒或待檢用抗體和包被用抗原。客戶提供含待測樣品的標(biāo)本,相關(guān)樣品的采集方法及注意事項(xiàng)可以與我公司技術(shù)人員溝通,樣本類型和要求如下表:


樣本類型

樣本要求

細(xì)胞培養(yǎng)上清

離心去沉淀,收集上清,樣本量>500μl。

組織勻漿

建議液氮研磨,加入蛋白酶抑制劑,樣本量>500μl。

細(xì)胞勻漿

建議加入蛋白酶抑制劑,樣本量>500μl。

血清、血漿

運(yùn)輸:加在緩沖液中(蛋白裂解液)低溫運(yùn)輸,樣本量>500μl。

其他類型樣品

避免反復(fù)凍融,樣本量>500μl。

ELISA檢測參考價(jià)格及項(xiàng)目周期

服務(wù)項(xiàng)目

服務(wù)時(shí)間

報(bào)價(jià)

服務(wù)內(nèi)容

交付結(jié)果

ELISA檢測

1-2周

260元/板

提供間接法ELISA、夾心法ELISA和競爭法ELISA的定性和定量測定。

原始數(shù)據(jù);數(shù)據(jù)分析結(jié)果;實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括實(shí)驗(yàn)環(huán)境條件、所用儀器設(shè)備型號(hào)、標(biāo)準(zhǔn)曲線分析、樣本濃度,可直接用于論文撰寫;


三、免疫共沉淀(Co-IP)技術(shù)服務(wù):

免疫共沉淀可對(duì)兩種已知蛋白是否存在相互作用進(jìn)行驗(yàn)證,也可以驗(yàn)證在總蛋白中是否含有與已知蛋白相互作用的未知蛋白。其實(shí)驗(yàn)方法為將靶蛋白A與目的蛋白B進(jìn)行孵育,形成“靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物。將靶蛋白的特異性抗體與復(fù)合物共孵育,形成“抗體-靶蛋白-目的蛋白”復(fù)合物,利用ProteinA/G純化。通過結(jié)合western blot及質(zhì)譜檢測等對(duì)兩種蛋白之間是否存在相互作用進(jìn)行定性分析。



客戶前期準(zhǔn)備

樣本類型

樣本要求(細(xì)胞、組織、蛋白樣本)

細(xì)胞樣本

細(xì)胞懸液或貼壁細(xì)胞:每份樣本至少 2×107 細(xì)胞,在運(yùn)輸前將培養(yǎng)液充滿整個(gè)容器,25T細(xì)胞瓶常溫運(yùn)輸。

凍存細(xì)胞:收獲培養(yǎng)的細(xì)胞后,離心去除培養(yǎng)液,PBS洗2次,立即置液氮中快速冷凍。液氮冷凍半小時(shí)后,保存于-80°C冰箱,干冰運(yùn)輸。提供量至少 2×107 細(xì)胞。

組織樣本

組織樣品預(yù)處理: 采集新鮮組織,組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入液氮或-80°C冰箱中保存。提供量動(dòng)物組織>400mg/樣本,植物組織>2g/樣本。

運(yùn)輸:干冰運(yùn)輸。

蛋白樣本

1. 裂解樣品總蛋白量>2ml/樣品;細(xì)胞樣品總蛋白濃度>1mg/ml;組織樣品總蛋白濃度10-15mg/ml。在實(shí)驗(yàn)前會(huì)進(jìn)行質(zhì)檢,以保證其質(zhì)量達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求;
2. 在提取總蛋白時(shí),加入蛋白酶抑制劑和磷酸蛋白酶抑制劑(尤其對(duì)于檢測磷酸化蛋白)。

運(yùn)輸:加在緩沖液中(蛋白裂解液)低溫運(yùn)輸。

客戶提供一抗

運(yùn)輸:依據(jù)說明書,一般4°C或-20°C運(yùn)輸,嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

免疫共沉淀(Co-IP)價(jià)格及項(xiàng)目周期

服務(wù)項(xiàng)目

服務(wù)時(shí)間

價(jià)格

服務(wù)內(nèi)容

交付結(jié)果

免疫共沉淀

4-5周

4500元/樣

Co-IP, Western blot鑒定Co-IP實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物

實(shí)驗(yàn)報(bào)告,原始實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

質(zhì)譜檢測

4-5周

3000元/樣

質(zhì)譜鑒定和驗(yàn)證Co-IP實(shí)驗(yàn)產(chǎn)物

質(zhì)譜鑒定結(jié)果